... 菌回來養: 應該怎麼樣解凍比較好 我假設你是用E Coli 900uL 菌液+ 400 uL glycerol 冰-80 每次要養用200mL 的pipet 裝上tip 輕挑一塊丟到LB 就可以養起來凍管馬上冰 ... ... <看更多>
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凍菌glycerol 在 [求救] 搖菌抽plasmid (large insert) 的推薦與評價
: 再放大, 還有50% glycerol(glycerol+H2O)autoclave沒問題 03/17 12:10. 3 F →kaofei ... 凍菌不是更會汙染出錯嗎 03/19 00:21. 28 F →kaofei: 好像沒發生過這樣的問題所以 ... ... <看更多>
凍菌glycerol 在 Re: [討論] 存菌? 凍菌? - 看板Biotech - 批踢踢實業坊 的推薦與評價
先謝謝你的回答^^ 不過還是有些問題想再請教...
※ 引述《uolink (uolink)》之銘言：
: ※ 引述《ararthur ()》之銘言：
: : 因為最近開始做細菌的實驗
: : 但實驗室的背景並沒有太多養細菌的protocol
: : 所以想請問一下
: : 為什麼我們實驗室裡會有一些在常溫下存放
: : 有裝著agar和菌的小管呢?
: : 並且其年限已經不可考
: 我想就把他們丟了吧
可...他們還會長耶@@
但菌數不多就是了
而且看起來好像是跟菌種中心買的說...
: : 我以為存菌必須加入15% glycerol 混勻後置入-80度的冰箱
: : 但不曉得為什麼會有這種菌株的存放方式
: : 所以想請教各位
: glycerol 是最簡單便宜的抗凍劑 可避免因為冰凍產生的冰晶傷害細菌
: : 另外也想問問 如果要從-80度裡取出之前存的菌回來養
: : 應該怎麼樣解凍比較好
: 我假設你是用 E Coli
: 900uL 菌液 + 400 uL glycerol 冰 -80
: 每次要養用 200mL 的 pipet 裝上 tip 輕挑一塊丟到 LB 就可以養起來
: 凍管馬上冰回去可以用非常多次
嗯嗯 但因為實驗需求 我的菌兒們並非是同一種菌
而是由某隻菌的monocolony(就是年限不可考的菌^^")挑出來後
進行random mutation的試驗
固可能裡面有著許多種菌 我也希望能有許多種菌
那這樣子的話就沒辦法直接挑一塊冰了
因為沒辦法涵蓋全部的菌種了吧...
所以說想說如果真的要完全解凍成液態才vortex取菌的話
步驟應該是如何才對呢?
另外我也有聽說 完全解凍菌會死掉的說法 不曉得正不正確!?
或是乾脆建議把整塊冰挖起來放下去呢?
這樣似乎有點粗魯...
再次謝謝^^"
: : 我現在用的方法是-20放置1 hr, 冰箱上層放置1 hr 下層放置1 hr
: : 然後才加100ul 進入新的LB medium(15~20ml)
: : 不過覺得長得很慢很慢
: : 所以這個地方有沒有什麼改善的空間呢?
: : 謝謝
--
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