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注意 這皆只有實驗結果
關於目的和步驟 從缺~~~~~~
實驗九 血球計數與血紅素量
目的:學習測量人體血液單位體積內紅血球數和白血球的數目與血紅素濃度
結果:
1.紅血球數目
1 2. 3 4 5 總計
每16小格的總數 80 83 112 106 96 507
血液中紅血球數5.07×106 個/mm3
(正常的女性紅血球數目約為4700000個 / mm3,關於紅血球的數目詳見討論第一點。)
2.白血球數目
1 2 3 4 總計
每大格的總數 15 12 11 16 13.5
血液中白血球的總數 2700 個/mm3
3.血紅素
血紅素的濃度為 18g/dL(測出的數值以女性而言略高)
問題與討論:
1. 紅血球計算時為什麼分別用不同的稀釋液計算?
紅血球計算:因為要計算紅血球之前,我們必須把用surfactant lysing agent(sodium laurel sulfate)把hemoglobin轉變成穩定態(stable form),像是methemoglobin or cyanmethemoglobin,所以用Hayem氏液,而主要的誤差大概源自於紅血球基質或白血球產生的混濁。
白血球計算:用Turk氏液,先把紅血球hemolysis,以免干擾計數,並且可以固定白血球,染出白血球的細胞核,。
(唉…..查了幾本書後,實在找不出很明確的答案,只找到幾行相關的)
(資料來源:Pratical Guide to Modern Hematology Analyzer ,1995)
Discussion:
1. 紅血球如果呈現過少,可能就是所謂的貧血;但如果過多,就成了紅血球增多症。以下分別就這兩種疾病加以描述:
a. 貧血的種類有分為缺鐵性貧血、巨母紅血球性貧血,血色素疾病和地中海貧血症候群、溶血性貧血這些種類,
在海平面高度,如果一成年人有以下情形便應該懷疑是貧血了:
男性 女性
紅血球量(×百萬/μL) <4.5 <4.0
血紅素(克每dL) <14.0 <12.0
血球容積 <41 <37
以上的下限數值是利用對大量的正常受測者得到的數值,再加以統計分析所得出。若有人的受測值較以上數值為低則他較可能是貧血的。例如,有一個相當健康的男性,他在每一年的健康檢查當中,血紅素含量均在每dL16至17克之間,直到有一年,檢查表示他的數值在每dL14.5克。雖然這個數值仍在所謂的正常範圍內,但對此人而言卻是不正常的。
鐵質的流失----我們知道鐵是血紅素主要的成分;一般而言,人體所排出的鐵量極微,所吸收的鐵質幾乎全留在體內正常的男人每天從腸道、汁、尿總共約排出0.9mg的鐵質。唯有失血,才會造成有意義的鐵質流失,另外女性正常月經期失血量為每月30至90ml,平均值為每月45ml。正常女性平均每天鐵質流失量為0.6mg,若加上月經造成鐵質的流失,則其平均鐵質的流失為每天1.1到2.1mg。
b. 紅血球增多症:
紅血球增多症通常只血液中紅血球濃度增加。病患若持續有下列數值,則可以考慮為紅血球增多症。
男性 女性
紅血球量(×百萬/μL) >6.0 >5.7
血紅素(克每dL) >18 >17
血球容積 >54 >51
以上三種有關紅血球濃度的數值如果都很高(血球容積超過60﹪),那麼可以說整個循環血液內紅血球的總數是增加的,也就是紅血球的量增加了;如果這些數值僅僅稍微增加,可能僅是因為血漿容積減少濃縮而造成相對性的紅 血球增多症。此時尚須測紅血球數量和血漿容積。
紅血球增多症的種類-----
1. 真性紅血球增多症:血液學上的原母細胞及並且有相同的起源,白血球和血小板也都增加,不限於紅血球。
2. 繼發性紅血球增多症:某些疾病引起紅血球生成激素產生過多,而引起紅血球增多。
3. 相對性紅血球增多症:又叫壓力性紅血球增多症或假性紅血球增多症,病因不明,慢性輕度的紅血球增多症,主要為血漿容積減少或正常值低,紅血球總量是正常或輕微增加。
2. Hayem氏液:顯微鏡檢查時稀釋血液用的溶液,含氯化汞、氯化鈉、硫酸鈉
和水。
以下是在不同的年齡白血球、血紅素、血比容血小板的正常數據範圍:
實驗十 血比容、血液凝固與紅血球沈降速率
目的:測定人體之血容比,血液凝固時間和紅血球沈降速率(ESR)
結果:
1. 血比容
離心後紅血球所佔的體積為 53.5 ﹪
校正後的血比容為 46.7 ﹪
2.凝血時間
1.對照 2.石臘油 3.棉花 4.碎冰
凝血時間 25:25 50:30 17:30 沒有凝固
回縮時間 55:00 1:30:00 1:08:00 沒有凝固
3.ESR 第一小時 12
第二小時 28.5
(正常女性:每小時沈降0至20)
問題與討論
1. 知道血漿體積後(plasma volume),如何計算全血量?
血球的量=全血量×血比容﹪
而 全血=血球+血漿
所以如果假設血漿體積為X,則全血量為X÷(1-血比容﹪)
一般人的血比容約45,但如果非貧血的病人,其血比容可能會降到45以下。
血比容的測量方法為離心然後測量血球所佔的高度百分比。
2. 靜脈血血比容修正值為Hct×0.91×0.96,為何如此?
我們適用試管模擬血管,所以造成血球會往中央集中,越靠管壁反而越少,而我們記錄的血比容是以中央的管壁為主,所以乘上0.91加以修正。
因為紅血球在沈積的時候是用堆疊的方式,而我們知道紅血球的形狀並非是圓盤狀,而是雙凹圓盤,所以在堆疊的時候,血球與血球之間會出現空隙,所以要乘以0.96。
3. 血液凝固時間之正常值?
如果是血液凝固的外在因子被啟動,其進行的速率便只受受傷組織所釋出的組織因子之量和血液中 第十、第七及第五凝血因子之量的限制,一般組織受到嚴重傷害的15秒內就會凝血。
而內在路徑的進行則較為緩慢,大約需1到6分鐘方能凝血。(外在路徑與內在路徑說明於discussion第一點)。
本實驗因為血液是在試管內進行凝固,所以凝血作用由內在路徑啟動,那些大於六分鐘的數據是最終血液完全凝固的時間,其實對照組跟有放棉花的那一組早在1分30秒左右就開始凝血了(此時石臘油那一組尚未凝血),而且棉花那一組在1分30秒的凝的也比較多,故符合一般血液凝固的正常值。
4. 利用本次和血球計數的結果,計算下列各式:
①平均紅血球血紅素含量(MCH)=血紅素/紅血球數(Hb g/l/million/mm3=pg)
180 / 5.07= 35.5 (正常值為27至34pg)
②平均紅血球體積(MCV)=血比容×10 / 紅血球數 (fL)。
46.7×10/5.07 =92.11
(正常人平均值為90fL,而正常的範圍是80至100FL)
③平均紅血球血紅素濃度(MCHC)=(血紅素/ 血比容)×100=g / dl
( 18/ 46.7 )×100=38.5
5. 將受試者全部的血液資料和正常值做比較。
正常 受測者
紅血球數 4700000/μL 5070000/μL
白血球數 2000至10000/μL 2700/μL
平均紅血球血紅素含量(MCH) 27至34pg 35.5pg
平均紅血球體積(MCV) 正常人平均值為90fL,而正常的範圍是80至100FL 92.fL
平均紅血球血紅素濃度(MCHC) 32至36克每dL 38.5克每dL
(資料來源:血液學,p15)
Discussion:
1. 凝血脢原活化複合物可經由兩種途徑產生(事實上此兩種途徑都會彼此交互作用)(1)外在路徑(extrinsic pathway),由於血管壁或附近組織受損;(2)內在路徑(intrinsic pathway),始於血液本身的受損。
此兩種途徑均有許多不同的血漿蛋白(特別是β球蛋白)以及其他參與血凝塊形成過程之因子(統稱為血凝固因子)參與其中,他們大部分均屬於為活化的蛋白分解脢,當轉變為活化形式時,其脢反應促使一連串的連鎖凝血反應產生。
血液一旦離開身體而放置於試管中,啟動凝血作用的是內在路徑。此時第十二因子及血小板由於與試管壁接觸而被活化,並因此啟動了內在機轉。若容器表面是不可濕性的(nonwettable),例如被矽化的表面,則凝血作用可被延遲達一小時以上。
以下是內在路徑的凝血機轉圖:
2. 放入冰中,使血液的代謝速率降低,所以在實驗有限的時間內,幾乎看不
到有凝塊。
3. 血凝塊收縮:
血凝塊在形成後的數分鐘之內開始收縮,通常在20~60分鐘內,血凝塊中的大部分液體會被壓榨出。
血小板在血凝塊收縮 的發生中有著重要的角色,因此,血凝塊若是無法
收縮,通常是表示循環血液中的血小板太少。在電子顯微鏡下,血凝塊中的
血小板與不同的纖維蛋白絲黏在一起,同時,陷在血凝塊中的血小板不斷地
分泌促凝血質,其中之一便是纖維蛋白穩定因子,此因子會使得附近的纖維
蛋白絲形成越來越多的交叉結合鍵結。血凝塊收縮時,破裂血管的兩側也同
時被拉近,而有助於更完善的止血。
4.測量ESR可以知道血液的黏稠度,通常隨著年齡的增大,血液黏稠度增加。
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