self-absorption化學 在 コバにゃんチャンネル Youtube 的最佳解答
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self-absorption化學 在 閱讀文章- 精華區NTUCH-HW - 批踢踢實業坊 的推薦與評價
Fluorescence spectroscopy
就是 給你能量 你放光給我看
就是有機實驗點TLC的那個 用UV燈顯色的那種啦
然後電子躍遷遵循 Franck Codon principle 電子組態改變但是形狀不會變
但是每個電子組態的基態就是長的不一樣 所以只好往上找其他振動態
所以 從 S0 基態跳上去之後 會到S1 的不知道哪個形狀一樣的振動態
然後會有各種不同的relaxation跟 conversion
1. internal conversion: 電子組態不同 但是能量相同
2. external conversion: 電子組態不同 外加散失能量(不放光)
3. intersystem conversion: 從Singlet 到 triplet的交換
螢光光譜的特點
呈鏡像但是本來應該重疊的譜線有一點偏差
1. 鏡像
因為 振動能階等差(就是該死的簡諧振子)
你可以畫 一個兩個電子能階 E=1 E=6
以及三個 振動能階 這樣就可以組成 E= 1, 2, 3, 4
E= 6, 7, 8, 9 兩組
從E= 1 上去到 上面那組 可以有 delta E = 5 6 7 8
E= 6 下去 可以得到 delta E = 5 4 3 2 這樣組合起來就有
2 3 4 5 5' 6 7 8 對稱的譜線了 然後雖然是能量 不過換成nm當波長也差不多對
稱這樣
2. 有一點點差異 那個 5 跟 5'
因為他跳上去之後啊 總是會有一點莫名其妙的relaxation 所以螢光那個 能量差會
稍微小一點
偵測器的位子跟光源成九十度 因為 你總不想測到光源吧XD
然後光源的話可以打入最大吸收的那個光 這樣才可以吸飽飽 放一堆光
這種偵測方式又稱作 luminescence
敏感度高 放射光強 I = k P(光源)C(濃度)
光源強一點敏感度就好一點
只是濃度太高還是會往下掉(self- absorption)
Beacon Molecule: 就是那個DNA分子平常沒事的時候會自己左右兩邊黏在一起
上面的發光團旁邊的消光團就會把他消掉
等到你的目標DNA出現就會把他們兩個拉開 就有光啦
(DNA說要有光 就有光(誤))
FRET Fluorescence Resonance Energy Transfer
重點是說有兩個螢光團 A B
A 吸收 藍光放綠光 B 吸收綠光放紅光
所以AB在一起的時候 你會看到紅色
分手的時候就會看到綠色
Chemiluminescence: 利用化學反應的時候發的光定量
最有名的就是 luminol跟 NO+ ozone吧
luminol + 血 ----> 藍光
NO + Ozone ---> NO2* ---> NO2 + hv
標記的方法大概有四種
1. radioactive
2. fluorescence
3. chemiluminescence
4. bioluminescence
5. enzyme labeling( 會把無色的受質 變成有色的受質)
EMIT Enzyme multiplied immunoassay technique
首先 有一個抗體可以抓你要測的分析物X
現在杯子裡面有限量的抗體 跟已知量的 有標記的X(上面的酵素可以把無色的受質變有色
)
只是一接上抗體就哭哭了
所以 X 越多 能跟抗體接的 XE就越少 XE自由得多 被變成有色的受質也多
就這樣
Solid Phase immunoassay
就是把抗體1黏在杯子上 這樣你的分析物X 沖進去的時候就可以黏在上面
再把抗體2放進去 抗體2上面的標記可以是放射性的
或是 酵素! 就是ELISA enzyme linked immuno sorbent assay
CRDS cavity ring down spectroscopy
光源 --> [ 樣品 ] ---> 偵測器
光只進不出 光一次只能出來一點點
所以光會在裡面來回走啊走 會一直被吸收 所以偵測器可以測到跟時間有關
的decay
Raman spectroscopy
1. Rayleigh scattering : 能量不變的散射(彈性碰撞)
Raman scattering: 能量有一點改變的散射(shift)
2. 簡單來說就是分子被基發上去之後沒有回到原來的地方
從基態出發但是沒回到基態(E變小 波長變大) --> Stokes line(強度大)
從激發態出發但是回到基態(E變大 波長變小) --> Anti-Stokes line(強度小)
光學元件用 FT-Raman 就是用干涉儀了啦
光源是單波長的雷射
就是 給你能量 你放光給我看
就是有機實驗點TLC的那個 用UV燈顯色的那種啦
然後電子躍遷遵循 Franck Codon principle 電子組態改變但是形狀不會變
但是每個電子組態的基態就是長的不一樣 所以只好往上找其他振動態
所以 從 S0 基態跳上去之後 會到S1 的不知道哪個形狀一樣的振動態
然後會有各種不同的relaxation跟 conversion
1. internal conversion: 電子組態不同 但是能量相同
2. external conversion: 電子組態不同 外加散失能量(不放光)
3. intersystem conversion: 從Singlet 到 triplet的交換
螢光光譜的特點
呈鏡像但是本來應該重疊的譜線有一點偏差
1. 鏡像
因為 振動能階等差(就是該死的簡諧振子)
你可以畫 一個兩個電子能階 E=1 E=6
以及三個 振動能階 這樣就可以組成 E= 1, 2, 3, 4
E= 6, 7, 8, 9 兩組
從E= 1 上去到 上面那組 可以有 delta E = 5 6 7 8
E= 6 下去 可以得到 delta E = 5 4 3 2 這樣組合起來就有
2 3 4 5 5' 6 7 8 對稱的譜線了 然後雖然是能量 不過換成nm當波長也差不多對
稱這樣
2. 有一點點差異 那個 5 跟 5'
因為他跳上去之後啊 總是會有一點莫名其妙的relaxation 所以螢光那個 能量差會
稍微小一點
偵測器的位子跟光源成九十度 因為 你總不想測到光源吧XD
然後光源的話可以打入最大吸收的那個光 這樣才可以吸飽飽 放一堆光
這種偵測方式又稱作 luminescence
敏感度高 放射光強 I = k P(光源)C(濃度)
光源強一點敏感度就好一點
只是濃度太高還是會往下掉(self- absorption)
Beacon Molecule: 就是那個DNA分子平常沒事的時候會自己左右兩邊黏在一起
上面的發光團旁邊的消光團就會把他消掉
等到你的目標DNA出現就會把他們兩個拉開 就有光啦
(DNA說要有光 就有光(誤))
FRET Fluorescence Resonance Energy Transfer
重點是說有兩個螢光團 A B
A 吸收 藍光放綠光 B 吸收綠光放紅光
所以AB在一起的時候 你會看到紅色
分手的時候就會看到綠色
Chemiluminescence: 利用化學反應的時候發的光定量
最有名的就是 luminol跟 NO+ ozone吧
luminol + 血 ----> 藍光
NO + Ozone ---> NO2* ---> NO2 + hv
標記的方法大概有四種
1. radioactive
2. fluorescence
3. chemiluminescence
4. bioluminescence
5. enzyme labeling( 會把無色的受質 變成有色的受質)
EMIT Enzyme multiplied immunoassay technique
首先 有一個抗體可以抓你要測的分析物X
現在杯子裡面有限量的抗體 跟已知量的 有標記的X(上面的酵素可以把無色的受質變有色
)
只是一接上抗體就哭哭了
所以 X 越多 能跟抗體接的 XE就越少 XE自由得多 被變成有色的受質也多
就這樣
Solid Phase immunoassay
就是把抗體1黏在杯子上 這樣你的分析物X 沖進去的時候就可以黏在上面
再把抗體2放進去 抗體2上面的標記可以是放射性的
或是 酵素! 就是ELISA enzyme linked immuno sorbent assay
CRDS cavity ring down spectroscopy
光源 --> [ 樣品 ] ---> 偵測器
光只進不出 光一次只能出來一點點
所以光會在裡面來回走啊走 會一直被吸收 所以偵測器可以測到跟時間有關
的decay
Raman spectroscopy
1. Rayleigh scattering : 能量不變的散射(彈性碰撞)
Raman scattering: 能量有一點改變的散射(shift)
2. 簡單來說就是分子被基發上去之後沒有回到原來的地方
從基態出發但是沒回到基態(E變小 波長變大) --> Stokes line(強度大)
從激發態出發但是回到基態(E變大 波長變小) --> Anti-Stokes line(強度小)
光學元件用 FT-Raman 就是用干涉儀了啦
光源是單波長的雷射
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self-absorption化學 在 absorbing意思2023-在Facebook/IG/Youtube上的焦點新聞和 ... 的推薦與評價
學術名詞化學名詞-化學術語, absorption, 吸收[作用]. 學術名詞生物學名詞-植物 ... self-absorbed 解釋. adj. 形容詞只顧自己的；自私的。 self : n （pl selves ）1 ... ... <看更多>
self-absorption化學 在 [問題] 分析物濃度愈濃，螢光強度愈強，why? - 看板Chemistry 的推薦與評價
※ 引述《ghdl0227 ()》之銘言：
: 各位大大好，我的問題如下:
: 1.根據skoog的儀分課本(6th.p407)濃度對螢光強度的效應最後面所言，自我吸收
: 和自我消光都會使得螢光強度對濃度的做圖呈現ㄧ個極大值，所以我認為濃度
: 愈強螢光強度愈強，是因為產生了自我吸收和自我消光所致，請問此判斷正確嗎?
應該說
螢光分子濃度愈大 遇光被激發的分子數愈多
螢光強度會變強
但是濃度太高的時候 會有自我吸收的狀況
也就是因為分子間距離較近
溶液表面螢光分子激發所放出的光會被周圍的螢光分子吸收
降低螢光強度
所以在較高濃度的狀況並不能直接判斷濃度愈高螢光強度愈強!
這樣出來的螢光光譜會被distort 因為放出的螢光被自己人吸掉了
: 2.我知道，自我消光是因為分子間碰撞的結果，且隨濃度的增加而增加(書上寫的)，
: 但是這與螢光強度變強有何關係?而且都已經自我"消光"了，何來增強螢光強度可言?
沒有關係
: 3.而根據skoog的儀分課本(6th.p408)說:<自我吸收是因為當發射的波長與吸收峰
: 重疊時就會產生；當發射光束穿過溶液而且被其他螢光分子再吸收時，螢光就會減
: 弱。>
這意思是說
這種self absorption會發生在螢光分子emission和absorption重疊的時候
有機的dye通常吸收和放射光譜都很寬 多少都會有重疊
除非是遇到stoke's shift超大的dye
: 請問這兩句話有什麼關聯嗎?又如果我第1點判斷正確，那此句話<當發射光束
: 穿過溶液而且被其他螢光分子再吸收時，螢光就會減弱>，是因為自我吸收造成的嗎?
: 如果是，那螢光都減弱了，又何來增強螢光強度可言?
: 真是抱歉問題有點多，這是因為儀分實驗做cyclodextrins經超分子化學作用去吸收
: 鈉螢光分子，而助教問我們cyclodextrins濃度愈高，螢光強度愈強的原因為何，所
: 以才去查書，而書上寫的又很模糊，我也查過網站，但是都沒有滿以的答案，故特
: 前來請教，希望各位大大可以幫忙一下，謝謝!
cyclodextrins結構很有趣
它有一個hydrophobic pocket 外圍則是hydrophilic
其本身不發螢光 所以螢光來源在於所謂的鈉螢光分子
我猜該螢光分子應該是solvent sensitive的dye
在沒加cyclodextrins的時候 螢光分子周圍環境是高極性的水
螢光強度很低(這是solvent sensitive的dye特性)
但是加入cyclodextrins後 該螢光分子被包在cyclodextrins的hydrophobic pocket裡
螢光分子周圍環境極性變低 螢光強度變高
如果對這方面有興趣的話
Lakowicz的Principles of Fluorescence Spectroscopy會有這方面的資訊
不然就是直接翻原始期刊文獻 應該會有解釋
--
※ 發信站: 批踢踢實業坊(ptt.cc)
◆ From: 123.194.108.167
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