菌種 本身需狀況良好 · 選擇適當的懸浮際避免冷凍傷害如脫脂奶、血清、醣類或混和物 · 每分鐘降溫一度一般是好的(結冰時會有熱量改變,需要專門機器) · 避免過度乾燥- 殺死菌 ... ... <看更多>
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菌種 本身需狀況良好 · 選擇適當的懸浮際避免冷凍傷害如脫脂奶、血清、醣類或混和物 · 每分鐘降溫一度一般是好的(結冰時會有熱量改變,需要專門機器) · 避免過度乾燥- 殺死菌 ... ... <看更多>
真菌低溫保存 · 先準備好螺旋蓋保存管,內裝1ml保存液(抗凍劑:10%甘油、2% Dextrin、2% Trehalose)後滅菌。 · 把要保存的菌培養在較營養的培養基或是特殊基質上,如PDA、 ...
甘油 终浓度一般为10%~20%。由于甘油原液太粘稠,需要配制合适的甘油-水溶液,将菌悬液与甘油以1:1的体积比充分混匀后,分装至提前灭菌好的保藏管中,-80℃ ...
菌种 保藏:甘油冷冻保藏法本方法适合于中、长期菌种保藏,保藏时间一般为2-4年左右。 (1)用火焰灭菌的接种环取斜面菌种在平皿上划线分离单菌落。 (2)平皿倒置 ...
做法是1.5 克木屑+0.45 克米糠,然後將含水量調整為64%左右,分裝至保存管中,經過消毒後,放入菇類菌絲塊,待菌絲長滿木屑,即可放入攝氏-20或-80 度的冰箱,如果要重複 ...
#5. CN103103123A - 一种改良保存菌种的方法 - Google Patents
本发明所提供的液体菌种的保存方法是将菌种与甘油、二甲基亚砜以合适比例混合,放进小泡沫盒里,再放入-20℃冰箱冻存。 甘油菌低温保存的基本原理是:在-70℃或液氮中冻存, ...
#6. 細菌菌種的保存@ 我的果園:: 隨意窩Xuite日誌
將甘油及蒸餾水以1:4 的比例混合,配製成100mL 或少於100mL 的甘油溶液,於滅菌釜中以120℃, 20 分鐘滅菌備用。取小量的甘油溶液,分裝於保存菌種用的小 ...
#7. 菌種保藏_百度百科
菌種 保藏(culture preservation,culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和 ... 寄主保藏法; 甘油管保存法; 冷凍乾燥保藏法; 注意事項; 影響因素; 菌的質量 ...
将挑取的菌苔接种至海博生物液体菌种保存管中,充分振荡,然后盖上盖子,上下颠倒,使菌种与保存液充分融合,之后放入超低温冰箱进行保存。 方法二:吸取菌悬液接种至液体 ...
结论使用甘油生理盐水保存法来保存菌种,各菌种保存时间长,方法简便,特别是使链球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般实验室得以保存。
#10. 常用菌種的傳代與保存方法 - 每日頭條
此法比斜面保存法的保存期限更長,黴菌、酵母菌、放線菌、芽孢菌可保存1-2年甚至更長時間,多數無芽孢菌也可保存到一年以上。 (3)甘油凍存保存法操作 ...
#11. 菇類菌種保存技術129
甘油,5 % DMSO是相當好之抗凍劑,唯DMSO對人體毒性較大,所以較少為. 學者所採用,但許多菌種仍需靠此一抗凍劑來保存菌株。 控制冷凍之降溫速率能使細胞外溶液凍結而細胞 ...
#12. ethanol/微生物菌種活化及保存班.md at master - GitHub
菌種 本身需狀況良好 · 選擇適當的懸浮際避免冷凍傷害如脫脂奶、血清、醣類或混和物 · 每分鐘降溫一度一般是好的(結冰時會有熱量改變,需要專門機器) · 避免過度乾燥- 殺死菌 ...
#13. 菌种保存方法介绍- 微基生物
菌种 保藏的基本原理是使微生物的生命活动处于半永久性的休眠状态,也就是将微生物的新陈代谢作用限制在最低范围内。 实验室常用的保菌方法有:甘油保菌法、斜面保菌法、 ...
#14. 实验室基础:甘油冻存菌、引物、质粒的保存 - 知乎专栏
按照菌种类型(如DH5α或者表达菌)的不同,分盒保存。冻存盒中的冻存管,可按冻存时间排列。冻存菌保存在-80℃冰箱或液氮罐中 ...
#15. 食藥用菇類菌種保存法
一,如美國菌種保存中心(ATCC)、英國國家微生物研究中心(CMI)、荷蘭真菌保存中心 ... 許多菌種仍需靠此一抗凍劑來保存菌株且存活率優於甘油(Hwang, 1968; ...
#16. 关于甘油冷冻保存菌种大家是怎么做的? - 微生物- 小木虫
(1)配置50%甘油,121摄氏度高压灭菌20min,4摄氏度冻存待用(2)菌液生长浓度达到一定OD值即可进行保存(3)850ul菌液+150ul灭菌甘油(4)一般保存在—20摄氏度即可,一年 ...
#17. 甘油菌種保存管瓷珠法凍存管菌種保存運輸2ml 歐克生物 - 淘寶
歡迎來到淘寶Taobao歐克微生物培養基,選購甘油菌種保存管瓷珠法凍存管菌種保存運輸2ml 歐克生物,品牌:歐克,型號:OK3029,顏色分類:20支/盒含瓷珠,50支/盒含瓷珠, ...
#18. 【1.1.4】甘油冻存菌、引物、质粒的保存 - Sam' Note
按照菌种类型(如DH5α或者表达菌)的不同,分盒保存。冻存盒中的冻存管,可按冻存时间排列。冻存菌保存在-80℃冰箱或液氮罐中 ...
#19. 【生物医学实验室日常】菌种的甘油保存法 - BiliBili
【生物医学实验室日常】 菌种 的 甘油保存 法. 搞科研的小安. 立即播放. 打开App,看更多精彩视频. 100+个相关视频. 更多. 甘油 冻存 保存 法操作视频_Trim.
#20. 菌株保存的一些小常识
对于菌株的保存并不太重视,保存临床阳性标本,对于临床教学、科研非常重要且十分 ... 甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因可能是加入生理盐水适当降低 ...
#21. 菌种保存过程的常见问题?看看专家怎么解答! - 食品伙伴网
而常用的甘油法,在复苏的过程中需用水浴锅快速溶解,在此过程中,对菌株伤害较大。 20、在使用后,菌种保存管的保存环境?需要-80℃冰箱吗 ...
#22. 【菌周刊】基操篇|菌种保存问题多?如何选择合适的菌种保存 ...
其中大肠杆菌主要使用的是甘油保存和低温真空保存法,而琼脂低温斜面保存主要适用的是细菌、酵母菌、霉菌保藏,液体石蜡保存法适用于保藏部分霉菌,酵母菌 ...
#23. 甘油冷冻保藏法
(5)按30%甘油:种子液为1:1(V/V)的量加入无菌甘油, 混合后分装至事先灭菌的菌种保存管(1-2mL/管),-70℃或液氮保存。 冷冻干燥保藏法.
#24. 實驗室常見菌株保存方式比較 - 壹讀
在菌種保存過程中,必須使微生物的代謝處於最不活躍或相對靜止的狀態, ... 甘油一生理鹽水保存液的製備:取甘油(分析純)8份加入生理鹽水2份,充分 ...
#25. 制药企业微生物实验室菌种保存方法的探讨 - 中国药事
结果:经菌种保存的方法学验证,液体石蜡覆盖保存法菌种保存时限最短仅为6个月,而使用10%甘油-生理盐水冷冻管保存法,细菌和酵母菌能保存24个月,霉菌保存18个月。
#26. 大肠杆菌的保存问题 - 医学教育网
如果有条件的话,菌种最好保存在-70,30-50%甘油可以保存半年左右。另外,如果是表达基因重组蛋白那就多提点质粒吧,质粒很容易保存,菌种不行了及时转化,反正也不 ...
#27. 香港海鸥菌不同保存方法效果比较
方法 采用半固体石蜡封存法,磁珠菌种保存管、10%甘油、15%甘油肉汤和30%甘油肉汤 ... 定期进行菌种复苏,采用活菌菌落计数比较不同方法的保存效果,观察期为12个月。
#28. 如何用甘油保存菌液? - 分析测试百科网
20%甘油保存菌种是指甘油:菌液=20:80800ul菌液加200u灭菌l甘油后的甘油后,充分混匀后,-70度保藏.(注意甘油要慢慢吸)
#29. 甘油保存管_试剂、培养基_宁波明舟生物科技有限公司
备注, 培养基配方:甘油保存管使用说明书【产品名称】B0004甘油保存管【产品规格】0.5ml×50支/盒【产品用途】菌种保藏【保存条件】常温【保存期限】3年【使用方法】 ...
#30. 「凍菌glycerol濃度」+1 [求救] 養BL21的問題? - 藥師家
「凍菌glycerol濃度」+1。...菌種保存glycerol...以Glycerol凍存的stock菌株.,甘油终浓度30%,也就是说,你可以配60%的甘油,然后和菌液1:1混匀即可...培养基 ...。
#31. 最全!微生物菌種保存方法匯總 - GetIt01
傳代培養就是要定期地進行菌種轉接、培養後再保存,它是最基本的 ... ⑤可在菌液內添加甘油等保護劑,以防止在冷凍過程中出現菌體大量死亡的現象。
#32. 菌種保存方法- 看板NCHU-PP87 - 批踢踢實業坊
低溫、乾燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏 ... 若作保存黴菌菌絲體用則需在安瓿管內預先加入保護劑如10%的甘油蒸餾水 ...
#33. 细菌冻存液,无菌甘油保存液 - 山东拓普生物工程有限公司
细菌冻存液,无菌甘油保存液,-菌种保存介质-山东拓普生物工程有限公司.
#34. 芜湖欧克瓷珠菌种保存管甘油菌种保存管50支/20支/盒用 ... - 京东
京东JD.COM是国内专业的网上购物商城,为您提供芜湖欧克瓷珠菌种保存管甘油菌种保存管50支/20支/盒用于菌种保存冷冻管冷冻保存液菌种冷藏管瓷珠法瓷珠菌种保存管20支/ ...
#35. 菌种冻存方法介绍原创 - CSDN博客
菌种 保藏的基本原理是使微生物的生命活动处于半永久性的休眠状态,也就是将微生物的新陈代谢作用限制在最低范围内。 实验室常用的保菌方法有:甘油保菌法 ...
#36. 中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)-客户留言
我在贵单位购买一株嗜热栖热菌10362,请问该菌株复苏以后,能否-80℃长期保存其甘油菌,保存甘油的浓度建议多少? 李金霞回复:. 您好!可以采用-80℃冰箱保藏,甘油终 ...
#37. 動物細胞的冷凍保存
甘油 可以高溫滅菌,而DMSO 則. 必須以過濾方式除菌,在使用DMSO 時要格外小心,因為它可快速. 穿透接觸的皮膚,而將有毒物質也一起帶入體內。 特別需注意的是,必須使用 ...
#38. 实验风采 - 广州先进技术研究所
将菌种接种在适宜的固体斜面培养基中培养,得到健壮菌株,加入无菌液体石蜡,高出 ... 甘油取甘油6份,生理盐水4份,充分混合后,灭菌备用;再将待保存菌种接种于肉汤 ...
#39. 菌种说明 - 上海保藏生物技术中心
菌种 名称. 大肠杆菌噬菌体MS2. 编号. SHBCC D24643. 规格. 冻干粉. 菌种主要应用. 二保存条件. 斜面、穿刺菌和冻干粉可常温运输,但应在4-10 度长期保存。甘油菌可常温 ...
#40. 一般製劑之微生物限量試驗
不超過100cfu)微生物,每個菌種使用的培養基分 ... 試驗菌種保存方法 ... 態、外觀、顏色等,並記錄繼代之代數,繼代5 次後,更換另一支新的甘油保存菌液。
#41. 菌种保存管常见问题解答之使用中操作问题 - 生物在线
菌种保存 管可保存一般细菌、苛刻菌,霉菌、酵母菌等真菌也可在低温条件 ... 菌株伤害较大,而且甘油法保存菌种,反复冻融,对菌株的伤害也是极大的。
#42. 發酵食品中耐酸、耐膽鹽及耐鹽乳酸菌之篩選
(五) 菌種保存:. 1. 將甘油以121℃高溫高壓滅菌15. 分鐘後取出,移入無菌操作台。 2. 將甘油與菌液1:1 混和於保存瓶. 內。 3. 以封口膜封起,震盪均勻。
#43. 弯曲菌菌种冷冻保存及复苏方法的研究 - 《中国食品卫生杂志》
摘要:目的探索一种简单、方便、有效的弯曲菌菌种保存方法。方法采用含30 %甘油的脑心浸液肉汤,将实. 验室保存的19 株弯曲菌于- 30 ℃和- 70 ℃分别保存,每个菌株3 个菌种 ...
#44. 凍存管 - 中文百科知識
凍存管又稱菌種保存管、磁珠保存管、磁珠凍存管。微生物實驗室常用的菌種保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。複雜程度各異,效果也差別很大。凍存管的組成菌種保存管 ...
#45. 菌种保藏的方法有哪些?各有什么优缺点? - 环凯微生物
此法广泛适用于细菌、放线菌、酵母菌和霉菌等大多数微生物菌种的短期保藏及不宜用冷冻干燥保藏的菌种。 放线菌、霉菌和有芽孢的细菌一般可保存6个月左右, ...
#46. (12) 发明专利申请
比例的甘油、二甲基亚砜和肉汤内,将冻存管放入. 泡沫盒內再放入冰箱进行冻存。经冷冻保存的液. 体菌种经解冻活化,接种固体培养基后能正常萌. 发。本发明改良的菌种保存 ...
#47. 实验室基础: 甘油冻存菌、引物、质粒的保存 - 网易
随着科研的深入、课题的进展,我们会从商家购买质粒菌种订购引物,我们自己也会构建许许多多的克隆载体。几乎实验室所有人都会产生很多冻存菌、引物及 ...
#48. 菌种保存大家谈。甘油的浓度。 - 豆丁网
菌种保存 大家谈。甘油的浓度。2009-08-1501:13大家好我是保藏中心最近发现基因酷保藏中心的共享菌株的保存出现了较严重的问题06年07年酷友共享的菌株 ...
#49. 分子实验中的物理学:甘油冻存菌种- 邵斌的博文 - 科学网—博客
一种解释是加入甘油可以降低溶液的冰点,这个说法看来很容易接受,但事实是我们冻存采用的15%的甘油溶液,冰点不低于-10度,而菌种保存的温度远低于-10度 ...
#50. 菌种长期保存的方法菌种如何长期保存呢 - 伊秀女性网
细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏,前两者可保藏2年左右,有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。 3、甘油管保存法。甘油管保存是利用微生物在甘油中 ...
#51. TG1甘油菌(D0389) - 碧云天
试剂> 核酸相关> 菌种与质粒> 菌种与培养. D0389. Y. TG1甘油菌. 促. 促. 一键复制产品信息. 产品编号: D0389. 产品包装:200μl. 选择包装. 200μl.
#52. 使用说明书
感受态细胞,又可把常态细胞(包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4ºC放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等)快速. 制备成感受态细胞。 产品特点.
#53. 微生物菌种的保存方法 - 正生生物
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是*基本的微生物保存法,例如 ... ⑤ 可在菌液内添加甘油等保护剂,以防止在冷冻过程中出现菌体大量死亡的现象。
#54. 屍皮保存有2種!低溫保存活性較佳 - 良醫健康網
... 甘油保存在4℃的冰箱,只保存皮膚的結構特性,無法保存皮膚的細胞活性,可以有效抵抗微生物菌種,並且成本低廉。 重症燒燙傷需自體植皮. 屍皮第2種 ...
#55. 肺炎链球菌几种保存方法的比较 - 北纳生物
1.1.5 菌种保存管 2ml安瓿或1.5ml连盖塑料离心管,高压灭菌后烘干。 2 方法. 2.1 甘油保存法 从生长良好的血平板上取2~3环肺炎球菌移入盛有0.5ml无菌 ...
#56. 微生物菌种保藏方法及关键技术
到完全停止的状态,不需定期移植。常用的保护. 剂有甘油、血清蛋白、糊精、吐温-80等。液氮超低. 溫保藏法是保藏菌种较理想的方法,变异的可能. 性较低,保存时间长达5~8a ...
#57. 医学微生物实验常用教学菌种保存方法的比较 - 论文网
甘油 原液保存法:将纯化后的待保存菌种,用高压消毒灭菌后的滤纸片正反面蘸取1-2个菌落,置于1.5ml EP管中,滴加0.3ml甘油原液,胶带将盖边缘封好于-70℃冰箱保存。
#58. 消毒试验用微生物要求 - 国家卫生健康委员会
如保存期内,斜面出现缺水、干裂等情况,灭菌处理后销毁。 5.2.2 菌种冻存管的保存. 菌种可采用甘油、液体石蜡、瓷珠等方式冻存,根据其特性选择适宜 ...
#59. 獸醫臨床免疫學及實習緒論實驗室注意事項及菌種 ... - 嘉義大學
實驗室注意事項及菌種(株)保存 ... 菌種(株)保存Maintenance of Stock Culture ... 細菌培養液+ 10 % 甘油或DMSO,分裝入ampule 內,以火焰封瓶。若用塑膠瓶則.
#60. 如何使用甘油保存菌种_上海丽臣生物 - 博客
由于纯甘油十分粘稠,很难定量,一般配成终浓度50% 的水溶液,高压灭菌后室温保存即可。使用时按50% 甘油:菌液= 1:1 混合均匀,然后迅速冻结。 A. 先把 ...
#61. 菌種保存管:簡介,操作步驟,產品原理,套用,注意事項
菌種保存 管 · 簡介. 使用過程中,將細菌接種在保存管內,放置於-20℃或-80℃環境中可長期保存。(-20℃可保存一年,-80℃可保存兩年)。 · 操作步驟. 1.直接刮取平皿上生長的新鮮 ...
#62. 1.3 CMPTM 試管培養基(PTM)
13 x 100 mm. Blood Agar Slant 血液斜面培養基. 一般細菌培養. A07-07. 16 x 125 mm. Blood with Glycerol 羊血甘油菌種保存液. 挑剔菌種保存. A07-1305. 2 mL micro-.
#63. 微生物工程实验模块实验二:菌种保藏的方法
肉膏蛋白胨斜面培养基,灭菌脱脂牛乳,灭菌水,化学纯的液体石蜡,甘油,五氧化二磷,河沙,瘦黄土 ... ②将需要保存的菌种,在适宜的斜面培养基上培养,使充分生长。
#64. 試驗方法- DMSO冷凍細胞原理 - 台灣實驗室網
但無論是甘油或DMSO,抗凍劑對細胞仍是有毒的,所以一旦在培養液中加入抗 ... 目前已有很多的化學化合物曾被單獨或混合使用為冷凍保存菌種的抗凍劑, ...
#65. 菌种甘油(冷冻)管藏法中甘油起什么作用? - 质量人
甘油 管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。 该方法适用于一般细菌的保存,同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需 ...
#66. DH10B大肠杆菌克隆菌株 - 北京华越洋生物
对DH10B使用LB,在37℃有氧的环境下培养,然后使用30%的甘油保藏菌种,42℃热激处理可 ... 1、菌种活化前,将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中,长时间室温下放置会 ...
#67. 菌种长期保存的方法 - 小红书
取含有细菌的肉汤在培养基上接种划线。菌种取完后立即放回原保存位置。 ➁甘油肉汤快速冷冻法保存的菌株:用接种环挑取一环后直接划线接种,无须解冻。
#68. 納豆菌種保存 - 台灣艾爾玩啤實驗
每個牌子的納豆都準備5支菌種,首先準備滅過菌的小離心管內裝甘油,再用滅過菌的牙籤挑2-3個納豆放入離心管中,並用牙籤攪拌,讓納豆在甘油中破裂成小 ...
#69. 利用反應曲面法對Lactobacillus acidophilus菌株任控低溫真空 ...
關鍵字: 應用研究;Controlled low-temp;食品科技;控低溫真空乾燥;凍結;冷凍乾燥;菌種保存;反應曲面法;保護劑;乳酸菌;Vacuum dehydration;Freezing;Freeze- drying ...
#70. 鲁青械备20200132号|运送培养基(甘油菌种保存)信息查询
中国上市医疗器械数据库提供鲁青械备20200132号|运送培养基(甘油菌种保存)的详细信息查询,包括注册证编号,批准备案日期,有效期,型号规格,生产公司青岛科盛源科技发展 ...
#71. 迟钝爱德华氏菌的保存方法 - 微生物学通报
摘要比较了7种不同方法保存迟钝爱德华氏菌的效果。测定存活力、毒力和生物学特性的结果表. 明,采用30%甘油PBS液保存该菌的效果较好。 关键词迟钝爱德华氏菌,菌种保存.
#72. 20%甘油保存菌种问题- 发酵工艺
请教大家,关于20%甘油保存菌种,有以下两种方案: (1)甘油:菌液=20:80,充分混匀后,分装到冷冻管于-20度保存。 (2)甘油:水=20:80,配制并灭菌后,将固体斜面的菌种 ...
#73. 表現納豆激之重組大腸桿菌的冷凍保存條件探討 - 博碩士論文網
在高菌體濃度(OD600=2.0)下,帶有pNT的重組E. coli之細胞存活率明顯較帶有pVN或pdVN的細胞為高。重組質體種類、甘油和保存菌種濃度並無明顯關聯性。
#74. 靈芝學術研究發展委員會-委員會成立文集
靈芝形態、菌種分離、人工栽培技術與菌種保存技術. 陳啟楨博士. 1. 前言. 靈芝作為藥物在中國已有五千年悠久的歷史,歷代著名之本草書籍均記載有關於靈芝的敘述,例如 ...
#75. 朝陽科技大學應用化學系生化科技碩士班碩士論文
牛樟芝菌種保存與皿培出菇研究探討. Studies on Screening Culture and Dish Culture of. Antrodia cinnamomea. 指導教授: 劉炳嵐博士.
#76. 探討以纖維水解液與粗甘油作為碳源對於高油脂酵母菌
本實驗所採用的菌株Rhodotorula glutinis,是購自生物資源保存及研究中心. Page 3. (Bioresource Collection and Research Center),. 菌種編號:BCRC 22360。 圖3-1 ...
#77. 菌种保存常见问题解答_菌株 - 搜狐
10、为什么说,如果有条件的话,菌种保存管最好置于-80 冰箱或液氮中? ... 而常用的甘油法,在复苏的过程中需用水浴锅快速溶解,在此过程中,对菌株 ...
#78. Microbank磁珠菌种保存管
Microbank™是种原创的独特系统(无菌即用型),包含冻存管、多孔小珠和特殊的低温保存液。相比传统的冻干法和甘油肉汤保存法,Microbank™可极大地简化细菌和真菌的 ...
#79. 瓷珠菌种保存法 - 中国食品科技网
甘油 冷冻保存法:用于一般细菌的保存,需使甘油终浓度为20%左右,然后-20℃或-70℃以下保存。融化时需要水浴溶化。 真空冷冻保存法:具有低温、干燥、无氧的 ...
#80. 別讓實驗敗在抗體失效!這5 個抗體保存要點你follow 了嗎?
儘可能避免使用無霜冰箱保存抗體,因其作用原理容易造成抗體反覆凍融。 · 使用抗凍劑- 由於甘油(Glycerol) 可以將冰點降低至-20°C 以下,因此有些研究人員 ...
#81. 0513菌種保存預備動作:接種至液體MRS - 楊容的學習記錄
預計明天要做菌種保存,所以先準備好滅菌的微量離心管和甘油。還要將九宮格三重複中的其中一盤拿來接種在液體MRS 中,放入培養箱35℃ 培養,明天才可以 ...
#82. 冻存管-冷冻管-永岳医疗
冻存管又称菌种保存管(冷冻管)。微生物实验室常用的菌种保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等,复杂程度各异,效果也差别很大。目前国内的大多数实验室都是实验人员 ...
#83. 微生物菌种管理的相关流程-帖子-北纳生物
将复苏后肉汤与灭菌甘油按15%甘油比例(肉汤8.5mL+甘油1.5mL)混合,-30 ℃冻存,(可用2mL冻存管冻存多管),作为保藏储备菌株F1代,也可使用商品化的菌种保存管。
#84. 磁珠瓷珠菌种保存管甘油管液体20/50支/盒冻存管芜湖欧克生物
磁珠瓷珠菌种保存管甘油管液体20/50支/盒冻存管芜湖欧克生物,试剂折扣商品,来自浙江杭州的淘宝卖家u[2208373358506]强烈推荐出售的磁珠瓷珠菌种保存管甘油管液体20/50 ...
#85. 冷冻干燥保藏法在粪菌移植中的应用潜力 - 热心肠研究院
① 粪便样品经冷冻干燥(FD)保存和甘油冻存12个月后,菌群的存活率、短链脂肪酸浓度和抗艰难梭菌(CD)的作用没有显著改变;② 水化后的FD粪便样本中 ...
#86. 中藥濃縮製劑微生物限量檢驗法
所有接觸菌種(液)之器具皆須經高溫高壓滅. 菌處理 ... 器具:無菌吸管、無菌菌種保存瓶及菌種盒. ◇ 材料:菌株、細菌培養液、20%無菌甘油溶液.
#87. 细菌冻存液 - Coolaber
通常-20ºC可以保存菌种一年,-80ºC可以长期保存菌种。 细菌冻存液有效成分为甘油。
#88. 目录
Part4 微生物菌种的保藏. 甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。 我们实验室常用甘油保存菌种:取需要保存菌种的菌液与50%灭菌 ...
#89. 食用紅麴有助降低膽固醇是真的嗎? 攝取量是重要關鍵
根據研究顯示,紅麴在發酵過程中會產生1種代謝物質「紅麴菌素」,其具有抑制膽固醇合成的功效,特別是對俗稱「壞膽固醇」的低密度脂蛋白及三酸甘油酯 ...
#90. 短柄帚霉:用于分析检测及电工电子产品试验菌 - 仪器信息网
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高 ... 保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。
#91. 【義美生醫】顧記池高濃度魚油(90粒/盒)
天然魚油的油脂結構為三酸甘油酯(TG型),TG型具有吸收快速的特性,美中不足的是濃度較低,因此一般會藉由酯化處理提升濃度,形成乙酯型/酯化型(EE型)。
#92. 奇亞籽的11大功效與副作用(8點使用禁忌請留意) - 營養新知
4種有益上呼吸道感染的替代療法(第1種最多人想問) ... 亞籽可降低總膽固醇、三酸甘油酯和低密度脂蛋白膽固醇水平,並提升高密度脂蛋白膽固醇水平。
#93. 紅麴功效降膽固醇、穩血壓!吃紅麴膠囊禁忌副作用先搞懂
所謂的紅麴是把蒸熟的米飯經由紅麴菌發酵後,所製成的一種發酵食品。 ... 紅麴是發酵食品,品質好壞關鍵之一取決於發酵環境、技術、保存,製程控管不 ...
#94. PPN6金蜂膠|每天兩滴,捍衛呼吸 - 營養師輕食
成分:蜂膠萃取液(甘油、蜂膠萃取物、水). 原產地:米蘭. 內容量:30ml. 保存方式:開封後請依照食用方式儘速食用完畢. 注意事項:. 對蜂製品過敏者,補充前請先諮詢 ...
菌種保存甘油 在 菌種保存方法- 看板NCHU-PP87 - 批踢踢實業坊 的推薦與評價
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微生物具有容易變異的特性,因此,在保藏過程中,必須使微生物的代謝處於最不活躍或
相對靜止的狀態,才能在一定的時間內使其不發生變異而又保持生活能力。
低溫、乾燥和隔絕空氣是使微生物代謝能力降低的重要因素,所以,菌種保藏方法雖
多,但都是根據這三個因素而設計的。
保藏方法大致可分為以下幾種:
1.傳代培養保藏法
又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等(後者作保藏厭氧細菌用),培養後於
4—6℃冰箱內保存。
2.液體石蠟覆蓋保藏法
是傳代培養的變相方法,能夠適當延長保藏時間,它是在斜面培養物和穿刺培養物上
面覆蓋滅菌的液體石蠟,一方面可防止因培養基水分蒸發而引起菌種死亡,另一方面可阻
止氧氣進入,以減弱代謝作用。
3.載體保藏法
是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而後進行乾燥的保藏
法,例如沙土保藏法和濾紙保藏法應用相當廣泛。
4.寄主保藏法
用於目前尚不能在人工培養基上生長的微生物,如病毒、立克次氏體、螺旋體等,它
們必須在生活的動物、昆蟲、雞胚內感染並傳代,此法相當於一般微生物的傳代培養保藏
法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法與冷凍乾燥保藏法進行保藏。
5.冷凍保藏法
可分低溫冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、乾冰酒精快速凍結(約-70℃)和液氮
(-196℃)等保藏法。
6.冷凍乾燥保藏法
先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然後在減壓下利用昇華現象除去
水分(真空乾燥)。
有些方法如濾紙保藏法、液氮保藏法和冷凍乾燥保藏法等均需使用保護劑來製備細胞
懸液,以防止因冷凍或水分不斷昇華對細胞的損害。保護性溶質可通過氫和離子鍵對水和
細胞所產生的親和力來穩定細胞成分的構型。保護劑有牛乳、血清、糖類、甘油、二甲亞
?等。
三、器材
細菌、酵母菌,放線菌和黴菌;
肉膏蛋白?斜面培養基,滅菌脫脂牛乳,滅菌水,化學純的液體石蠟,甘油,五氧化
二磷,河沙,瘦黃土或紅土,冰塊、食鹽,乾冰,95%酒精,10%鹽酸,無水氯化鈣;
滅菌吸管,滅菌滴管,滅菌培養皿,管形安瓿管,淚滴形安瓿管(長頸球形底),40
目與 100目篩子,油紙,濾紙條(0.5×1.2cm),乾燥器,真空泵,真空壓力錶,噴燈
,L形五通管,冰箱,低溫冰箱(-30℃),液氮冷凍保藏器。
四、操作步驟、各保藏法的應用範圍及優缺點
下列各法可根據實驗室具體條件與需要選做。
1.斜面低溫保藏法
將菌種接種在適宜的固體斜面培養基上,待菌充分生長後,棉塞部分用油紙包紮好,
移至2—8℃的冰箱中保藏。
保藏時間依微生物的種類而有不同,黴菌、放線菌及有芽孢的細菌保存2—4個月,移
種一次。酵母菌兩個月,細菌最好每月移種一次。
此法為實驗室和工廠菌種室常用的保藏法,優點是操作簡單,使用方便,不需特殊設
備,能隨時檢查所保藏的菌株是否死亡、變異與污染雜菌等。缺點是容易變異,因為培養
基的物理、化學特性不是嚴格恒定的,屢次傳代會使微生物的代謝改變,而影響微生物的
性狀;污染雜菌的機會亦較多。
2.液體石蠟保藏法
(1)將液體石蠟分裝於三角燒瓶內,塞上棉塞,並用牛皮紙包紮,1.05kg/cm2>,
121.3℃滅菌30分鐘,然後放在40℃溫箱中,使水汽蒸發掉,備用。
(2)將需要保藏的菌種,在最適宜的斜面培養基中培養,使得到健壯的菌體或孢子
。
(3)用滅菌吸管吸取滅菌的液體石蠟,注入已長好菌的斜面上,其用量以高出斜面
頂端1cm為準(圖Ⅶ-12),使菌種與空氣隔絕。
(4)將試管直立,置低溫或室溫下保存(有的微生物在室溫下比冰箱中保存的時間
還要長)。
此法實用而效果好。黴菌、放線菌、芽孢細菌可保藏2年以上不死,酵母菌可保藏1—
2年,一般無芽孢細菌也可保藏1年左右,甚至用一般方法很難保藏的腦膜炎球菌,在37℃
溫箱內,亦可保藏3個月之久。此法的優點是製作簡單,不需特殊設備,且不需經常移種
。缺點是保存時必須直立放置,所佔位置較大,同時也不便攜帶。從液體石蠟下面取培養
物移種後,接種環在火焰上燒灼時,培養物容易與殘留的液體石蠟一起飛濺,應特別注意
。
3.濾紙保藏法
(1)將濾紙剪成0.5×1.2cm的小條,裝入0.6×8cm的安瓿管中,每管1—2張,塞
以棉塞,1.05kg/cm2>,121.3℃滅菌30分鐘。
(2)將需要保存的菌種,在適宜的斜面培養基上培養,使充分生長。
(3)取滅菌脫脂牛乳1—2ml滴加在滅菌培養皿或試管內,取數環菌苔在牛乳內混勻
,製成濃懸液。
(4)用滅菌鑷子自安瓿管取濾紙條浸入菌懸液內,使其吸飽,再放回至安瓿管中,
塞上棉塞。
(5)將安瓿管放入內有五氧化二磷作吸水劑的乾燥器中,用真空泵抽氣至幹。
(6)將棉花塞入管內,用火焰按圖Ⅶ-13熔封,保存於低溫下。
(7)需要使用菌種,復活培養時,可將安瓿管口在火焰上燒熱,滴一滴冷水在燒熱
的部位,使玻璃破裂,再用鑷子敲掉口端的玻璃,待安瓿管開啟後,取出濾紙,放入液體
培養基內,置溫箱中培養。
細菌、酵母菌、絲狀真菌均可用此法保藏,前兩者可保藏2年左右,有些絲狀真菌甚
至可保藏14—17年之久。此法較液氮、冷凍乾燥法簡便,不需要特殊設備。
4.沙土保藏法
(1)取河沙加入10%稀鹽酸,加熱煮沸30分鐘,以去除其中的有機質。
(2)倒去酸水,用自來水沖洗至中性。
(3)烘乾,用40目篩子過篩,以去掉粗顆粒,備用。
(4)另取非耕作層的不含腐植質的瘦黃土或紅土,加自來水浸泡洗滌數次,直至中
性。
(5)烘乾,碾碎,通過100目篩子過篩,以去除粗顆粒。
(6)按一份黃土、三份沙的比例(或根據需要而用其他比例,甚至可全部用沙或全
部用土)摻合均勻,裝入10×100mm的小試管或安瓿管中,每管裝1g左右,塞上棉塞,進
行滅菌,烘乾。
(7)抽樣進行無菌檢查,每10支沙土管抽一支,將沙土倒入肉湯培養基中,37℃培
養48小時,若仍有雜菌,則需全部重新滅菌,再作無菌試驗,直至證明無菌,方可備用。
(8)選擇培養成熟的(一般指孢子層生長豐滿的,營養細胞用此法效果不好)優良
菌種,以無菌水洗下,製成孢子懸液。
(9)於每支沙土管中加入約0.5ml(一般以剛剛使沙土潤濕為宜)孢子懸液,以接
種針拌勻。
(10)放入真空乾燥器內,用真空泵抽幹水分,抽幹時間越短越好,務使在12小時內
抽幹。
(11)每10支抽取一支,用接種環取出少數沙粒,接種於斜面培養基上,進行培養,
觀察生長情況和有無雜菌生長,如出現雜菌或菌落數很少或根本不長,則說明製作的沙土
管有問題,尚須進一步抽樣檢查。
(12)若經檢查沒有問題,用火焰熔封管口,放冰箱或室內乾燥處保存。每半年檢查
一次活力和雜菌情況。
(13)需要使用菌種,復活培養時,取沙土少許移入液體培養基內,置溫箱中培養。
此法多用於能產生孢子的微生物如黴菌、放線菌,因此在抗生素工業生產中應用最廣
,效果亦好,可保存2年左右,但應用於營養細胞效果不佳。
5.液氮冷凍保藏法
(1)準備安瓿管用於液氮保藏的安瓿管,要求能耐受溫度突然變化而不致破裂,因
此,需要採用硼硅酸鹽玻璃製造的安瓿管,安瓿管的大小通常使用75×10mm的,或能容1
.2mm液體的。
(2)加保護劑與滅菌保存細菌、酵母菌或黴菌孢子等容易分散的細胞時,則將空安
瓿管塞上棉塞,1.05kg/cm2,121.3℃滅菌15分鐘:若作保存黴菌菌絲體用則需在安瓿
管內預先加入保護劑如10%的甘油蒸餾水溶液或10%二甲亞?蒸餾水溶液,加入量以能浸
沒以後加入的菌落圓塊為限,而後再用1.05kg/cm2>,121.3℃滅菌15分鐘。
(3)接入菌種將菌種用10%的甘油蒸餾水溶液製成菌懸液,裝入已滅菌的安瓿管;
黴菌菌絲體則可用滅菌打孔器,從平板內切取菌落圓塊,放入含有保護劑的安瓿管內,然
後用火焰熔封。浸入水中檢查有無漏洞。
(4)凍結再將已封口的安瓿管以每分鐘下降1℃的慢速凍結至-30℃。若細胞急劇冷
凍,則在細胞內會形成冰的結晶,因而降低存活率。
(5)保藏經凍結至-30℃的安瓿管立即放入液氮冷凍保藏器(圖Ⅶ-14)的小圓筒內
,然後再將小圓筒放入液氮保藏器內。液氮保藏器內的氣相為-150℃,液態氮內為-196℃
。
(6)恢復培養保藏的菌種需要用時,將安瓿管取出,立即放入38—40℃的水浴中進
行急劇解凍,直到全部融化為止。再打開安瓿管,將內容物移入適宜的培養基上培養。
此法除適宜於一般微生物的保藏外,對一些用冷凍乾燥法都難以保存的微生物如支原
體、衣原體、氫細菌、難以形成孢子的黴菌、噬菌體及動物細胞均可長期保藏,而且性狀
不變異。缺點是需要特殊設備。
6.冷凍乾燥保藏法
(1)準備安瓿管用於冷凍乾燥菌種保藏的安瓿管宜採用中性玻璃製造,形狀可用長
頸球形底的,亦稱淚滴型安瓿管(圖Ⅶ-15),大小要求外徑6—7.5mm,長105mm,球部
直徑9—11mm,壁厚0.6—1.2mm。也可用沒有球部的管狀安瓿管。塞好棉塞,1.
05kg/cm2>,121.3℃滅菌30分鐘,備用。
(2)準備菌種,用冷凍乾燥法保藏的菌種,其保藏期可達數年至十數年,為了在許
多年後不出差錯,故所用菌種要特別注意其純度,即不能有雜菌污染,然後在最適培養基
中用最適溫度培養,使培養出良好的培養物。細菌和酵母的菌齡要求超過對數生長期,若
用對數生長期的菌種進行保藏,其存活率反而降低。一般,細菌要求24—48小時的培養物
;酵母需培養3天;形成孢子的微生物則宜保存孢子;放線菌與絲狀真菌則培養7—10天。
(3)製備菌懸液與分裝以細菌斜面為例,用脫脂牛乳2ml左右加入斜面試管中,製成
濃菌液,每支安瓿管分裝0.2ml。
(4)冷凍冷凍乾燥器有成套的裝置出售,價值昂貴,此處介紹的是簡易方法與裝置
,可達到同樣的目的。
將分裝好的安瓿管放低溫冰箱中冷凍,無低溫冰箱可用冷凍劑如乾冰(固體CO2>)酒
精液或乾冰丙酮液,溫度可達-70℃。將安瓿管插入冷凍劑,只需冷凍4—5分鐘,即可使
懸液結冰。
(5)真空乾燥為在真空乾燥時使樣品保持凍結狀態,需準備冷凍槽,槽內放碎冰塊
與食鹽,混合均勻,可冷至-15℃。裝置儀器如圖Ⅶ-16,安瓿管放入冷凍槽中的乾燥瓶內
。
抽氣一般若在30分鐘內能達到93.3Pa(0.7mmHg)真空度時,則乾燥物不致熔化,
以後再繼續抽氣,幾小時內,肉眼可觀察到被乾燥物已趨乾燥,一般抽到真空度26.7Pa
(0.2mmHg),保持壓力6—8小時即可。
(6)封口抽真空乾燥後,取出安瓿管,接在封口用的玻璃管上,可用L形五通管(圖
Ⅶ-17)繼續抽氣,約10分鐘即可達到26.7Pa(0.2mmHg)。於真空狀態下,以煤氣噴燈
的細火焰在安瓿管頸中央進行封口。封口以後,保存於冰箱或室溫暗處。
此法為菌種保藏方法中最有效的方法之一,對一般生活力?的微生物及其孢子以及無
芽胞菌都適用,即使對一些很難保存的致病菌,如腦膜炎球菌與淋病球菌等亦能保存。適
用於菌種長期保存,一般可保存數年至十餘年,但設備和操作都比較複雜。
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